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Comment choisir une solution de conservation des échantillons ?

Nombre Parcourir:0     auteur:Éditeur du site     publier Temps: 2021-02-18      origine:Propulsé

enquête

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 Comment choisir une solution de conservation des échantillons ?

1、Comment choisir le type de solution de conservation?

Selon la composition du liquide, il peut être grossièrement divisé en deux types, inactivé et non inactivé.Parmi eux, la solution de conservation des virus inactivés contient du Tris, du sel de guanidine, de l'EDTA, etc., dont le but principal est de détruire les enveloppes protéiques des cellules et des virus, et de libérer des acides nucléiques, de sorte que la détection des acides nucléiques puisse être effectuée par des moyens réels ultérieurs. RT-PCR à fluorescence temporelle pour déterminer si l’échantillon contient la séquence du virus.La solution de conservation inactivée peut lyser efficacement la structure du virus et lui faire perdre sa capacité à infecter.Il est plus sûr pour les inspecteurs et peut inhiber efficacement la reproduction des champignons et des bactéries.Cependant, en raison de l’ajout de sel de guanidine, il peut laisser des ions sel dans la solution d’acide nucléique.Si la concentration est trop élevée et si l'activité polymérase dans le kit de test en aval est très sensible à la concentration en ions sel, la valeur Ct du test sera en retard, voire faussement négative.

La solution de conservation non inactivée comprend généralement les types UTM et VTM.Les composants de la solution de préservation des virus non inactivés sont principalement basés sur la solution de Hank.Sur la base de la solution de Hank, il ajoute également divers tampons tels que la gentamicine, les antibiotiques fongiques, la BSA (bovine Le cinquième composant de l'albumine sérique), le tampon biologique HEPES, les acides aminés, les cryoprotecteurs, la glycérine et d'autres composants sont utilisés pour


maintenir l’intégrité et l’activité biologique du virus.La solution de conservation non inactivée préserve mieux l’intégrité du virus, le taux de détection est donc plus élevé, mais elle nécessite un traitement d’inactivation au bain-marie avant la détection.

Les utilisateurs peuvent choisir raisonnablement le type de solution de préservation en fonction de leurs propres scénarios d'utilisation.


2. Après le stockage des échantillons, quelle est la sensibilité de détection ?

Afin de faciliter la sélection des différents types de tubes de stockage, nous avons testé différentes marques, dans des conditions de stockage à 4℃, et différents jours de stockage (le premier jour, le troisième jour, le septième jour, le quatorzième jour et le

trentième jour).La sensibilité de la détection des acides nucléiques du nouveau coronavirus

est comme suit.

1

2

Après 14 jours de stockage à 4°C, la comparaison de l'effet de conservation de différentes marques d'UTM

1


Afin de faciliter la sélection de différents types de tubes de conservation, nous avons testé la sensibilité de la détection des acides nucléiques du nouveau coronavirus sous différentes marques, conditions de stockage à température ambiante et différents jours de stockage (le premier jour, le troisième jour et le septième). jour).Les résultats sont les suivants.


Après 7 jours de stockage à température ambiante, comparaison des effets de stockage de différentes marques d'ITM

1

Après 7 jours de stockage à température ambiante, comparaison des effets de stockage de différentes marques de VTM


1



Après 7 jours de stockage à température ambiante, comparaison des effets de stockage de différentes marques d'UTM

2

En général, la valeur Ct de Bioteke est inférieure à celle de certaines marques courantes sur le marché, quelles que soient la température ambiante ou les conditions de stockage à 4 ℃.La sensibilité de détection est plus élevée et les résultats des tests sont plus stables.


3、 Quel est l'effet de la solution de préservation d'inactivation (ITM) ?

Tableau.Nombre de plaque à différents temps d'inactivation (0, 1, 2, 5, 10, 20, 40min)

Virus

Titre du virus

Temps d'inactivation

Nombre de plaques

Acceptabilité

y

HSV-1







1×10^5

UFP/mL







0

48

55

51

/

1 minute

0

0

0

Accepté

2 minutes

0

0

0

Accepté

5 minutes

0

0

0

Accepté

10 minutes

0

0

0

Accepté

20 min

0

0

0

Accepté

40 minutes

0

0

0

Accepté

1



Chiffres de plaque à différents temps d'inactivation (0, 1, 5, 40 min) (la plaque est représentée dans l'encadré rouge)


Conclusions :

Le produit Bioteke, inactivant les milieux de transport ( ITM ) , peut inactiver efficacement le virus HSV 1.


4. Caractéristiques de la solution de préservation des virus Bioteke


a) Fournir plusieurs types de solutions de préservation telles que UTM, VTM et ITM ;

b) Il peut être utilisé avec l’écouvillon Bioteke pour répondre à de multiples besoins ;

c) Matières premières sélectionnées, associées au kit d'extraction d'acide nucléique Bioteke pour garantir la quantité de copie initiale de l'échantillon.


5.%2 Les rapports d'inspection que Bioteke a obtenus pour la solution de préservation des virus


Normes

Unité de test

ISO EN11137-1:2015 EN11137-2:2013

OIN EN11137-3:2017

Technologie d'essai Cie., Ltd de Wujiang Dasheng.

ISO11737-1:2018

GV

ATTEINDRE

GV

OIN 10993

GV

Pièce jointe : environnement de production


Les références

【1】《Nouveau guide technologique de test de laboratoire de pneumonie coronarienne (troisième édition)》, Centre chinois de contrôle et de prévention des maladies.


【2】 《Directives provisoires pour la collecte, la manipulation et les tests d'échantillons cliniques de patients sous enquête (PUI) pour le nouveau coronavirus 2019 (2019-nCoV)》.

【 3 】 A Stephen K Hashmi, Miriam Bührle, Michael Wölfle,et al.

Qualification de

écouvillons floqués à haute récupération par rapport aux écouvillons en rayonne traditionnels pour la surveillance environnementale microbiologique des surfaces [J].Journal pda de science et technologie pharmaceutiques, 2008, 62(3):191.

【4】 Daley P, Castriciano S, Chernesky M, Smieja M. Comparaison d'écouvillons floqués et rayonne pour la collecte de cellules épithéliales respiratoires auprès de volontaires non infectés et de patients symptomatiques.J Clin Microbiol.

2006;44(6):2265-2267.est ce que je:10.1128/JCM.02055-05.

【5】Ba Huajie, Jin Ming, Wang Linsheng et al.Comparaison des effets de typage ADN entre des tampons de flocage en nylon et des cotons-tiges [J].Journal chinois de médecine légale, 2015(03):53-56.

【6】 Liu Yanbin, Liu Tao, Cui Yue, Wang Bo, Luo Fengming.Comparaison de deux méthodes d'échantillonnage d'écouvillonnage nasal et d'écouvillonnage de gorge dans le dépistage des acides nucléiques pour la nouvelle pneumonie à coronavirus [J].Journal chinois des soins respiratoires et critiques, 2020, 02 : 141-143.


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