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Introduction aux machines PCR

Nombre Parcourir:0     auteur:Éditeur du site     publier Temps: 2021-11-08      origine:Propulsé

Introduction aux machines PCR

Machine à pcr, également appelé instrument d'amplification de gène PCR, instrument d'amplification PCR, instrument d'amplification de l'acide nucléique de la chaîne de la polymérase, est un instrument qui amplifie l'ADN spécifique à l'aide de la technologie PCR (réaction de la chaîne polymérase). La machine PCR est largement utilisée dans des laboratoires médicaux et biologiques, tels que pour déterminer si un organisme de test exposera des machines PCR est largement utilisé dans des laboratoires médicaux et biologiques, par exemple pour déterminer si un organisme de test présente un profil de maladie génétique, afin de diagnostiquer infectieux maladies, pour reproduire les gènes et identifier la filiation. Qu'est-ce qu'une machine PCR?

Voici la liste de contenu:

l La structure de base d'une machine PCR

l Principe de fonctionnement de la machine PCR

L La cinétique de réaction des machines PCR


La structure de base d'une machine PCR

Une machine PCR consiste généralement en une partie de couverture à chaud, une partie de cycle thermique, une pièce de transmission, une partie de commande et une partie d'alimentation, etc.

Principe de fonctionnement de la machine PCR

Le principe de fonctionnement de laMachine à pcrEst semblable au processus de réplication naturelle de l'ADN, dont la spécificité dépend des amorces d'oligonucléotides complémentaires aux deux extrémités de la séquence cible et se compose de trois étapes de réaction de base: la dénaturation-recuit-extension.

1. Denaturation de l'ADN de modèle

L'ADN de modèle est chauffé à environ 93 ° C pendant un certain temps pour dissocier l'ADN de gabarit à double brin ou l'ADN à double brin formé par une machine PCR pour le rendre seul brin afin qu'il puisse se lier aux amorces de préparation la prochaine série de réactions.

2. recuit (dénaturation) de l'ADN de modèle et des amorces

Une fois que l'ADN de gabarit est dénaturé en un seul brin en chauffant, la température est abaissée à environ 55 ° C et les amorces sont jumelées et liées à la séquence complémentaire à un échrouement de l'ADN de modèle.

3. Extension des amorces

Le conjugué d'amorce de modèle d'ADN est synthétisé sous l'action de TaqDna polymérase, à l'aide de DNTP comme matériau de réaction et la séquence cible comme modèle, afin de synthétiser un nouveau brin répliqué de demi-conservé complémentaire du brin d'ADN de modèle selon le principe de base -Les réplication de succursale et semi-conservée.

En répétant le processus de dénaturation-recuit-extension, peut être obtenu davantage \"des chaînes de réplication semi-conservées \", et ces nouvelles chaînes peuvent être utilisées comme des modèles pour le cycle suivant.

La machine PCR prend 2 ~ 4 minutes pour compléter chaque cycle, et ainsi de suite, l'ADN produit dans chaque cycle peut devenir le modèle pour le cycle suivant, et chaque cycle amplifie le numéro de copie de la région spécifique à l'ADN entre deux amorces synthétiques de 1 -PLAD et le produit de la machine PCR amplifie rapidement sous la forme exponentielle de 2. Après 25 ~ 30 cycles (2 ~ 3 heures), la machine PCR peut théoriquement amplifier le gène plus de 109 fois après 25 ~ 30 rounds (2 ~ 3 heures), et en pratique, il peut généralement atteindre 106 ~ 107 fois.

Cinétique de réaction de la machine PCR

Les trois étapes de réaction duMachine à pcrsont répétés, entraînant une augmentation exponentielle de la quantité d'amplification de l'ADN. L'amplification finale de l'ADN de la réaction peut être calculée à l'aide de Y = (1 + x) n. Y représente le nombre de copies du fragment d'ADN amplifié, X représente l'efficacité moyenne de l'amplification par amplification et N représente le nombre de cycles. La valeur théorique de l'efficacité de l'amplification moyenne est de 100%, mais au stade précoce de la réaction réelle, l'augmentation du fragment d'ADN de séquence cible est exponentielle et avec l'accumulation progressive de produits de machine PCR, le fragment d'ADN amplifié n'augmente plus exponentiellement, mais entre la période de croissance linéaire ou la période stationnaire, c'est-à-dire l'effet \"stagnation \", de sorte que l'efficacité moyenne de la machine PCR atteigne l'efficacité moyenne de la machine PCR n'atteint pas la valeur théorique.

Bioteke Corporation, qui se concentre sur les diagnostics moléculaires et la détection rapide, en particulier sur l'extraction de l'acide nucléique, est un fabricant de haute technologie professionnel et des machines PCR. Il est situé dans la ville de Wuxi, la province de Jiangsu, la Chine. Nous sommes donc impatients de coopérer avec vous.

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