Nombre Parcourir:0 auteur:Éditeur du site publier Temps: 2022-05-25 origine:Propulsé
La préparation d'une solution d'or colloïdal pour le Test d'antigène adopte la méthode de réduction du citrate trisodique pour préparer une solution d'or colloïdal.Prendre 1000 mL d'eau ultra pure et la porter à ébullition sur un agitateur magnétique, ajouter 40 mL de solution d'acide chloroaurique à 1 %, lorsque la solution bout à nouveau, ajouter rapidement 36 mL de solution de citrate trisodique à 1 %, poursuivre l'ébullition lorsque la couleur de la solution devient violette après 5 minutes, éteignez le chauffage et restaurez le volume d'origine avec de l'eau ultrapure après refroidissement.Le diamètre moyen et le potentiel zêta des particules d’or colloïdal ont été mesurés avec un analyseur de taille de nanoparticules et stockés à température ambiante dans l’obscurité.Alors, quelles sont les informations sur la préparation de solutions d’or colloïdal pour le test Antigène ?Nous allons jeter un coup d'oeil.
Voici la liste du contenu :
l Préparation de conjugués marqués à l’or colloïdal
l Préparation de bandelettes de test rapide d'Antigène
l Limite minimale de détection
lTest de stabilité
Prélever 100 mL d'or colloïdal Antigen test dans deux béchers propres, respectivement, selon les conditions de pH optimisées marquées, ajouter 3,3 mL et 2,1 mL de carbonate de potassium 0,1 mol/L pour ajuster le pH, remuer avec un agitateur magnétique à 300 r/ min pendant 10 min, et ajouter l'anticorps monoclonal anti-protéine N de souris et la protéine DNP-BSA chacun à raison de 1 mg et agités pendant 15 minutes ;2 ml de solution à 10 % de BSA ont été ajoutés, et 2 ml de solution à 10 % de BSA ont été ajoutés, et l'agitation a été poursuivie pendant 20 minutes ;après agitation, la solution d'or colloïdal du test Antigen a été transférée dans deux tubes à centrifuger de 50 ml, les paramètres de centrifugation étaient de 9 000 tr/min, 20 min et 4 °C, et une centrifugation a été effectuée.Après centrifugation, sortir délicatement le tube à centrifuger, ne pas agiter, retirer le surnageant à l'aide d'une pipette, récupérer le précipité, le reconstituer avec 10 mL de diluant conjugué et conserver à 4°C dans l'obscurité.Le diamètre moyen et le potentiel zêta des particules conjuguées d’or colloïdal du test Antigène ont été mesurés par un analyseur de taille de nanoparticules.
Le tampon d'échantillon a été uniformément recouvert de la solution de traitement du tampon d'échantillon, et la quantité de revêtement de chaque fibre de verre était de 30 ml et séchée à 50 °C pendant 24 heures.Diluer le test rapide d'antigène Anticorps monoclonal anti-protéine N de souris marqué à l'or colloïdal et conjugué de protéine DNP-BSA marqué à l'or colloïdal avec un diluant de conjugué, le rapport volumique est de 18 % et 20 %, respectivement, et traiter avec le conjugué d'or colloïdal dilué, le tampon de coupleur était uniformément enduite de liquide, la quantité de revêtement de chaque fibre de verre était de 30 ml et elle a été séchée à 45 °C pendant 24 h.L'anticorps monoclonal anti-protéine N de souris et l'anticorps polyclonal anti-DNP de lapin ont été dilués avec du PBS contenant 0,01 mol/L pH 7,4 et 5 % de tréhalose à la concentration de 2,0 mg/mL et 1,0 mg/mL, respectivement.En tant que ligne de détection (ligne T) et ligne de contrôle qualité (Cline), l'anticorps de capture a été enduit sur une membrane de nitrocellulose (membrane NC) et séché à 45 °C pendant 48 h.Le film NC préparé, le tampon conjugué, le tampon d'échantillon et le tampon absorbant l'eau ont été collés tour à tour sur la plaque inférieure en PVC, coupés en bande de 3 mm avec une découpeuse, placés dans un étui à cartes et emballés dans un sac en papier d'aluminium.Pendant le test, insérez l'écouvillon nasopharyngé dans le tube de levage pré-rempli de la solution d'extraction (10 mmol/LPBS, pH7,4, 1 % NP-40), et ajoutez 3 gouttes (100 μL) goutte à goutte dans le trou d'échantillon du test. carte après extraction pendant 15s.Temps de réaction de 15 minutes pour l'interprétation visuelle.La ligne T et Cline du test d'antigène sont toutes deux positives, la ligne T n'est pas colorée, Cline est négative, Cline n'est pas colorée, ce qui indique que la bandelette de test est efficace et qu'elle doit être retestée.
Des études sur la limite minimale de détection ont été réalisées avec des cultures virales tuées par la chaleur.L’éluat des écouvillons nasopharyngés de personnes en bonne santé a été utilisé comme matrice négative pour le test Antigène.Tout d’abord, une dilution en gradient de 10 fois a été réalisée.Après le résultat négatif du test rapide d'antigène, la concentration précédente était alors diluée par un gradient de 2, et pas moins de 19 tests sur 20 étaient positifs.Le niveau de concentration (≥95 %) a été utilisé comme limite minimale de détection du réactif.
Placez la carte de réactifs préparée pour le test d'antigène dans un four à 50 °C et testez-la avec des substances de contrôle de qualité à haute et faible concentration toutes les deux semaines.Répétez le test 3 fois pour chaque échantillon.La différence de profondeur de bande entre le réactif de destruction accélérée à haute température et le réactif témoin pendant 1 semaine et 8 semaines.
Ce qui précède constitue les informations pertinentes sur la préparation de la solution d’or colloïdal pour le test Antigène.Si vous êtes intéressé par le Test rapide d'antigène COVID-19, Test rapide d'antigène SARS-CoV-2, vous pouvez nous contacter.Notre site Web est www.bioteke.cn.
